台盼蓝染色鉴别死活细胞的原理是什么？（细胞计数台盼蓝染色,结果细胞都被染成了蓝色,同一个样,中性红染色又都变成了红色）

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台盼蓝染色鉴别死活细胞的原理是什么？

通常认为细胞膜丧失完整性，细胞即可被认为已经死亡。台盼蓝是检测细胞膜完整性最常用的生物染色试剂。健康的正常细胞能够排斥台盼蓝，而死亡的细胞，膜的完整性丧失，通透性增加，细胞可被台盼蓝染成蓝色。

染色：细胞悬液与0.4%台盼蓝溶液以9:1混合混匀。（终浓度0.04%）。

计数：在三分钟内，分别计数活细胞和死细胞。

镜下观察，死细胞被染成明显的蓝色，而活细胞拒染呈无色透明状。

扩展资料：

机理：

正常的活细胞，胞膜结构完整，能够排斥台盼蓝，使之不能够进入胞内；而丧失活性或细胞膜不完整的细胞，胞膜的通透性增加，可被台盼蓝染成蓝色，通常认为细胞膜完整性丧失，即可认为细胞已经死亡，这与中性红作用相反。

因此，借助台盼蓝染色可以非常简便、快速地区分活细胞和死细胞。台盼蓝是组织和细胞培养中最常用的死细胞鉴定染色方法之一。注意凋亡小体也有台盼蓝拒染现象。

台盼蓝染色后，通过显微镜下直接计数或显微镜下拍照后计数，就可以对细胞存活率进行比较精确的定量。台盼蓝染色只需3-5分钟即可完成，并且操作非常简单。

百度百科-台盼蓝

细胞计数台盼蓝染色,结果细胞都被染成了蓝色,同一个样,中性红染色又都变成了红色

台盼蓝是检测细胞膜完整性最常用的生物染色试剂。健康的正常细胞能够排斥台盼蓝，而死亡的细胞，膜的完整性丧失，通透性增加，细胞可被台盼蓝染成蓝色。活细胞细胞膜有选择透性，对台盼蓝的透性小，进入细胞慢。若染色时间过长，台盼蓝可能通过胞吞或胞饮作用进入细胞。进而显示为蓝色。

中性红是一种弱碱性 pH 指示剂，变色范围 pH6.4～8.0之间（由红变黄）。在中性或微碱性环境中，植物的活细胞能大量吸收中性红并向液泡中排泌，由于液泡在一般情况下呈酸性反应，因此，进入液泡的中性红便解离出大量阳离子而呈现樱桃红色，在这种情况下，原生质和细胞壁一般不着色；死细胞由于原生质变性凝固，细胞液不能维持在液泡内，因此，用中性红染色后，不产生液泡着色现象，相反，中性红的阳离子，却与带有一定负电荷的原生质及细胞核结合，而使原生质与细胞核染色。

所以我推测是你染色时间过长，或者是你的实验操作过程中导致细胞都死亡完了，所以都能被染色。